【产品名称】
通用名称:人胰岛素样生长因子1检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:IGF-1 ELISA
【包装规格】96人份/盒
【预期用途】
本产品用于体外定量测定血清中的人胰岛素样生长因子1(IGF-1)。仅供科研使用,不用于临床诊断。
背景知识
胰岛素样生长因子1(IGF-1)或生长调节素C(SM-C)是一种基本的70个氨基酸的单链多肽(MW:7649 Da),类似于胰岛素原(50%序列同源性),也类似于生长调节素家族的另一特征性成员:IGF II(67AA,与IGF-1的70%序列同源性)。IGF-1是最重要的因素,它介导生长激素的促生长作用,生长激素是一种由于脉动释放而血液水平高度波动的垂体激素。由于与载体蛋白的结合,IGF-1的血液浓度更稳定。主要结合蛋白(MW 53000)的浓度以及IGF-1的产生都受到生长激素的调节。IGF-1由肝脏和其他组织产生,具有内分泌、旁分泌和自分泌活性。它刺激生长并调节各种组织的分化,发挥胰岛素样活性,促进软骨生长。尽管生长激素是控制IGF-1分泌和浓度的最重要因素,但其他因素也其决定作用:年龄(青春期达到峰值)、性别、营养状况和其他激素(雌激素,甲状腺素,催乳素等)。特定的营养刺激主要控制特定器官局部微环境中的IGF-1分泌(旁分泌活性),而血液中IGF-1的浓度是平衡系统生长(内分泌活性)最重要的变量。
【检验原理】
人胰岛素样生长因子1检测试剂盒(酶联免疫法)是一种在聚苯乙烯滴定板上进行的固相酶扩增敏感性免疫测定。
在本试剂盒中,DIAsource引入了预处理步骤,以提高检测的临床性能。已证实结合蛋白干扰了IGF-1的酶联免疫测定。DIAsource采用的是Daughaday等人的酸-乙醇法(8)。
固定量的辣根过氧化物酶(HRP)标记的IGF-1与校准品、质控品和样本中未标记的IGF-1竞争特定抗体上有限数量的结合位点。室温下孵育1小时后,清洗滴定板,终止竞争反应。加入显色底物(TMB),孵育15分钟。加入终止液终止反应,采用酶标仪读取吸光度。通过测量吸光度确定底物周转量,吸光度与IGF-1浓度成反比。
【主要组成成分】
试剂 |
规格 |
色码 |
备注 |
微量滴定板:抗IGF-1包被 |
96孔 |
蓝色 |
可直接使用 |
结合物:含酪蛋白和百里香酚的磷酸盐缓冲液中HRP标记的IGF-1 |
1瓶
0.2ml |
黄色 |
用共轭缓冲液100x稀释 |
共轭缓冲液:含酪蛋白和百里香酚的磷酸盐缓冲液 |
1瓶
11,5ml |
红色 |
可直接使用 |
预处理溶液:含乙醇 |
1瓶
20ml |
黑色 |
可直接使用 |
复溶液:含乙醇 |
1瓶
10ml |
蓝色 |
可直接使用 |
中和溶液:含牛酪蛋白和叠氮化物的磷酸盐缓冲液(<0.1%) |
1瓶
30ml |
绿色 |
可直接使用 |
校准品0:溶于含牛酪蛋白的磷酸盐缓冲液 |
1瓶
冻干品 |
黄色 |
加入1ml复溶液 |
校准品1-5:溶于含牛酪蛋白的磷酸盐缓冲液(精确值见标签) |
5瓶
冻干品 |
黄色 |
加入1ml复溶液 |
质控品:溶于含百里香酚的人血浆 |
2瓶
冻干品 |
银色 |
加入1ml蒸馏水 |
洗液(Tris-HCl)) |
1瓶
10ml |
棕色 |
用蒸馏水100x稀释(使用电磁搅拌器) |
显色TMB溶液(四甲基联苯胺) |
1瓶
25ml |
棕色 |
可直接使用 |
终止液:HCl 1.0 N |
1瓶
12ml |
白色 |
可直接使用 |
注:用校准品0稀释样本;
1ng校准品制剂相当于1ng NIBSC 1
st WHO IS 02/254。
【储存条件及有效期】
本产品在2-8℃下保存,可保存至失效日期。
生产日期及失效日期见试剂盒标签。
未使用的微孔板,应立即放回附有干燥剂的铝箔袋中,封好,置于2-8℃下保存。
复溶后的校准品和质控品在2-8℃可保存一周,分装并置于-20℃下最多可保存3个月。避免连续冻融。
浓缩洗液在室温下可保存至失效日期。
新鲜制备的工作洗液只能在当天使用。
工作IGF-1-HRP结合物在室温下可保存4小时,避免光照。
试剂外观的改变可能表明不稳定或恶化。
【适用仪器】
适用于具有450和650nm波长的酶标仪。
【样本要求】
血清应置于2-8℃下保存。
如果实验时间超过24小时,建议分装并置于-20℃下保存,避免随后的冻融循环。
注意事项:
(1)实验开始前,确保样本恢复至室温,建议使用前旋涡振荡样本。
(2)请勿使用溶血样本。
仅供科研使用。